普通高等教育"十二五"规划教材:微生物学实验.pdf

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书籍描述

内容简介
微生物学是实践性很强的学科,微生物学实验技术是该学科的重要内容。本书介绍了:①微生物学的基本实验操作方法和技术。包括:微生物细胞形态学研究方法,微生物的纯培养技术,微生物的分离,纯化及其鉴定方法等。②微生物生理、微生物遗传以及细菌血清学鉴定等方面的操作技术和方法。③微生物学的应用技术,其中包括微生物细胞发光酶基因标记,不同背景条件(例如土壤、水体、昆虫、动物及植物材料)下特定微生物的分离和生物学特性研究技术等。

编辑推荐
《普通高等教育"十二五"规划教材:微生物学实验(第2版)》可作为高等院校生命科学、微生物学、生物技术、生物工程、资源环境及植物病理学等专业的教学用书,也可作为研究生和相关研究人员的参考书。

目录
第一部分微生物的形态学研究方法
Ⅰ微生物的形态观察
一、细菌的形态观察
实验一普通光学显微镜的使用及活细菌观察
实验二细菌的简单染色和革兰氏染色
实验三细菌的荚膜染色
实验四细菌的芽孢染色
实验五细菌的鞭毛染色(附细菌的运动性观察)
实验六蓝细菌的培养与观察
二、放线菌形态观察
实验七用玻璃纸琼脂平板透析培养法观察放线菌形态
实验八用插片培养法观察放线菌的形态
实验九放线菌的印片染色法
三、真菌的形态观察
实验十霉菌形态及无性孢子的观察
实验十一霉菌封闭标本的制备
实验十二霉菌接合孢子的培养与观察
实验十三酵母菌子囊孢子的培养与观察
实验十四伞菌担子和担孢子的压片观察
实验十五镰刀菌分生孢子的培养与观察
四、病毒的形态观察
实验十六昆虫病毒多角体的染色与观察
实验十七噬菌斑的培养与观察
五、藻类和原生动物的形态观察
实验十八衣藻和水绵的形态观察
实验十九草履虫和眼虫的培养与观察
实验二十变形虫的培养与观察
Ⅱ微生物的大小与数量测定
实验二十一微生物细胞大小的测定
实验二十二微生物细胞的显微直接计数法
实验二十三稀释平板测数法
实验二十四稀释培养计数
实验二十五比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
第二部分微生物的纯培养技术
Ⅰ培养基的制备
一、培养基的配制方法
二、几种常用培养基的配制
实验二十六牛肉膏蛋白胨培养基的制备
实验二十七高氏一号合成培养基的制备
实验二十八马丁一孟加拉红培养基的制备
实验二十九马铃薯蔗糖琼脂培养基的制备
实验三十土壤浸出液培养基的制备
实验三十一麦芽汁培养基和米曲汁培养基的制备
实验三十二明胶培养基的制备
实验三十三石蕊牛乳培养基的制备
Ⅱ灭菌和消毒
一、干热灭菌法
二、湿热灭菌法
三、过滤除菌
四、紫外线杀菌
五、化学药剂消毒杀菌
Ⅲ微生物接种技术
一、接种前的准备工作
二、几种常用的接种技术
第三部分微生物的营养与环境条件
实验三十四营养元素对微生物生长的影响
实验三十五氧气对微生物生长的影响
实验三十六温度对微生物生长的影响
实验三十七pH对微生物生长的影响
实验三十八紫外线杀菌实验
实验三十九化学药剂对微生物的作用
实验四十微生物的拮抗实验
实验四十一微生物的耐盐性实验
第四部分微生物的分离与纯化
Ⅰ微生物纯培养分离纯化的一般方法
实验四十二土壤中好气性细菌的分离与计数(附划线分离法)
实验四十三厌氧细菌的分离培养
实验四十四土壤中纤维素分解菌的分离培养
实验四十五土壤中的固氮菌的分离培养
实验四十六豆科植物根瘤中根瘤菌的分离
实验四十七死虫中苏云金芽孢杆菌的分离
实验四十八土壤中有机磷农药降解菌的分离
实验四十九土壤中放线菌的分离与计数
实验五十土壤中真菌的分离与计数
实验五十一酒曲中酵母菌的分离
实验五十二担子菌的弹射分离
实验五十三土壤中丛枝菌根真菌的筛选分离
实验五十四自然环境中噬菌体的分离
实验五十五土壤中藻类的分离
实验五十六土壤中原生动物的分离
Ⅱ微生物的形态鉴定方法
实验五十七各类微生物菌落的识别
Ⅲ微生物的生理鉴定常规实验
实验五十八微生物对含碳化合物的分解和利用
唯一碳源实验
糖、醇、糖苷类碳源的分解实验
淀粉水解实验
纤维素分解实验
果胶分解实验
油脂水解实验
甲基红(M.R.)实验
乙酰甲基甲醇(V.P.)实验
柠檬酸盐实验
实验五十九微生物对含氮化合物的分解和利用
唯一氮源实验(无机氮)
明胶液化实验
石蕊牛乳实验
产氨实验
产硫化氢实验
硝酸盐还原实验
吲哚实验
实验六十微生物的产酶实验
过氧化氢酶实验
苯丙氨酸脱氨酶实验
卵磷脂酶实验
实验六十一利用BIOLOG系统进行微生物的分类鉴定
Ⅳ微生物的血清学鉴定
实验六十二抗血清制备
实验六十三直接凝集反应
实验六十四免疫电泳
实验六十五双向免疫扩散
Ⅴ微生物的分子鉴定
实验六十六细菌总DNA的提取
实验六十七PCR扩增细菌16SrRNA序列
实验六十八细菌16SrRNA序列的克隆
第五部分微生物育种技术和菌种保藏
实验六十九三亲本杂交
实验七十细菌的专性转导
实验七十一细菌的转座突变
实验七十二细菌的互补测验
实验七十三大肠杆菌的中断杂交实验
实验七十四紫外线诱变技术及营养缺陷型突变株的筛选
实验七十五亚硝酸诱变技术及乳糖发酵突变株的筛选
实验七十六原生质体融合
实验七十七脉孢菌的分离和交换
实验七十八微生物菌种保藏
第六部分应用微生物实验
实验七十九豆科植物根瘤的固氮酶活性测定
实验八十根瘤菌的荧光标记及检测
实验八十一泡囊丛枝状菌根的染色
实验八十二苏云金芽孢杆菌杀虫剂的生物测定
实验八十三抗生素的效价测定(管碟法)
实验八十四棉铃虫核多角体病毒的室内培养及效价测定
实验八十五乙醇发酵(附巴斯德效应)
实验八十六乳酸发酵
实验八十七酸奶制作
实验八十八水中细菌总数和大肠菌群的检测
实验八十九食品中菌落总数和大肠菌群的检测
实验九十食品中沙门氏菌的检测
实验九十一环境微生物细胞的固定化技术
实验九十二产蛋白酶和淀粉酶芽孢杆菌的分离和酶活力检测
实验九十三利用PCR—DGGE方法对土壤微生物群落多样性的检测
主要参考文献
附录一微生物实验课常用玻璃器皿的清洁法
附录二教学常用菌种
附录三常用培养基配方
附录四常用染色液的配制
附录五缓冲液的配制
附录六常用试剂和指示剂的配制
附录七微生物混浊度计数法麦兰云度计的配制与菌数对照表
附录八几种法定单位的名称与换算
附录九最大或然数统计表

文摘
版权页:



2.大肠菌群的检测
(1)培养基:乳糖胆盐发酵管,乳糖发酵管,伊红美蓝琼脂培养基(EMB)(见实验七十)。
(2)试剂:革兰氏染色液等。
(3)器材:平皿、试管、发酵管、吸管、三角瓶、广口瓶、均质器或乳钵、培养箱、恒温水浴锅等。
(四)实验方法
1.菌落总数的检测
1)检样稀释及培养
(1)以无菌操作,将检样25g(或25mL)剪碎以后,放于装有225mL无菌水的三角瓶(瓶内预先放适当数量的玻璃珠)中或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
(2)将上述样品进行十倍稀释,稀释度视食品情况而定。
(3)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别吸取1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做3个重复。
(4)稀释液移入平皿后,应迅速将熔化后保温在45℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基注入平皿15~20mL,并转动平皿使混合均匀,同时将培养基倾入加有1mL空白稀释剂(即不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
(5)待琼脂凝固后,倒置平板,于(36±1)℃恒温箱内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得1g(1mL)样品所含菌落总数。
2)菌落计算方法和报告
同实验八十八水中菌落总数的测定方法中的菌落计数报告方式。
2.大肠菌群的检测
1)检验程序
食品中大肠菌群检测程序见图6—4。
2)操作步骤
(1)采样及稀释。

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