生物工程专业实验.pdf

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书籍描述

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生物工程是一门实践性很强的专业,要求学生具有很强的实验操作、实验设计以及实验数据分析能力。因此,实验教学对培养合格的生物工程专业学生至关重要。对学生实验能力的要求,除了具备简单的生物分子检测分析、PCR、电泳、微生物接种、微生物培养等基本实验技能外,更需要具备功能基因的克隆、表达载体与工程菌的构建、功能蛋白的表达与调控、目的蛋白的分离纯化及应用等综合实验能力。这些能力贯穿于生物工程所涉及的上游、中游、下游各方面。
对此,杨忠华、左振宇等在综合分析生物工程专业知识体系特点的基础上,结合生物工程专业培养计划的要求,编写了《生物工程专业实验(高等学校十二五规划教材)》这本以工业生物技术为专业方向的生物工程专业实验指导书。

目录
第1篇生物工程常用实验技术及原理
第1章生物化学实验基本理论1
1��1电泳技术1
1��2PCR技术2
1��3糖、核酸、蛋白质等生物分子浓度的测定3
第2章微生物学实验基本理论4
2��1微生物学实验的意义4
2��2微生物的显微观察及染色原理4
2��3微生物的培养及分离纯化7
2��4微生物的生理生化鉴定8
2��5微生物的生长繁殖9
第3章重组DNA技术10
3��1目的基因的获取10
3��2基因与载体的连接(以质粒载体为例)11
3��3重组基因导入受体细胞构建工程菌11
3��4筛选含有目的基因的受体细胞12
第4章发酵工程实验原理14
4��1发酵的基本内容14
4��2发酵过程的组成14
4��3发酵罐的类型15
4��4发酵罐及培养基的灭菌15
4��5发酵培养基的配制17
4��6发酵过程的控制17
第5章常用生物分离实验技术及原理18
5��1细胞破碎18
5��2过滤和离心18
5��3沉淀18
5��4萃取19
5��5膜分离20
5��6色谱20
第6章生物反应工程实验原理22
6��1均相酶催化反应动力学22
6��2生物反应器中氧的传递特性25
第7章细胞固定化及生物催化原理30
7��1细胞固定化概述30
7��2细胞固定化方法30
7��3生物催化概述31
第2篇实 验 部 分
第8章生物化学实验32
实验8��1部分药品试剂的配制及高压灭菌32
实验8��2还原糖的测定――3,5�捕�硝基水杨酸(DNS)比色法34
实验8��3基因组DNA的分离提取及电泳检测36
实验8��4DNA浓度及纯度的测定38
实验8��5蛋白质的SDS��PAGE检测39
实验8��6牛乳球蛋白基因的PCR扩增及电泳检测40
第9章微生物学实验41
实验9��1显微镜的使用及微生物形态的观察41
实验9��2细菌的革兰染色法44
实验9��3牛肉膏蛋白胨培养基的制备47
实验9��4微生物分离、纯化及培养特征观察52
实验9��5空气中微生物的检测58
实验9��6淀粉水解实验61
实验9��7大肠杆菌生长曲线的测定63
第10章基因工程实验65
实验10��1E��coli基因组DNA的提取及电泳检测65
实验10��2glyA基因PCR扩增、检测和纯化67
实验10��3质粒pET28a的提取及检测69
实验10��4质粒pET28a��glyA的构建71
实验10��5感受态细胞的制备和转化73
第11章发酵工程实验76
实验11��1实验室常用发酵罐的基本结构与功能76
实验11��2发酵罐及培养基的灭菌与接种培养技术78
实验11��3利用大肠杆菌E��coli BL21(DE3)(pET28a��glyA)工程菌表达丝氨酸羟
甲基转移酶81
实验11��4固态发酵法生产柠檬酸85
第12章生物分离工程实验89
实验12��1植物细胞的破碎及超氧化物歧化酶的浸提89
实验12��2考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量91
实验12��3联大茴香胺盐酸盐法测定超氧化物歧化酶活力93
实验12��4双水相系统萃取超氧化物歧化酶95
实验12��5热激和盐析法提取超氧化物歧化酶97
实验12��6纤维素离子交换柱色谱纯化超氧化物歧化酶99
第13章生化反应工程实验101
实验13��1Lineweaver��Burk法测定胰蛋白酶米氏常数101
实验13��2动态法测定溶氧的体积传质系数104
第14章酶工程实验107
实验14��1α�驳矸勖傅奶崛∮牖盍Σ舛�107
实验14��2酵母细胞固定化及催化前手性苯乙酮不对称还原合成手性醇110
附录112
附录1生物工程实验室安全和规则112
附录2常用缓冲液的配制118
附录3常用抗生素和酶的配制121
附录4常用培养基的配制121
附录5实验室常用贮存液的配制122
附录6实验室常用技术参数126
参考文献128

内容简介
本书打破了原各单独课程的界限,以知识工艺的内在联系出发安排实验项目,以培养学生系统掌握生物工程专业的基础知识。该教材按照生物产品的生产特性与规律,依据生物产品生产的上、中、下游顺序的主要特性与共性问题组织设计实验。选定一种典型的工程蛋白,从基因克隆、表达载体的构建、工程菌的培养以及工程蛋白的高效表达设置实验,使学生对整个生物产品的生产过程得到全局、全面、系统的理解和锻炼,革新了当前生物工程专业实验的教学思想。同时把偏向于工业生物技术的“生物化学实验”与“微生物学实验”也纳入该实验指导书,以增强该指导书的综合性与实用性。
本书可作为生物工程、生物技术专业本科生的教材,也可供相关专业技术人员参考。

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