普通高等教育"十三五"规划教材·生物工程生物技术系列:应用微生物学实验.pdf

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书籍描述

内容简介
全书分为概述、微生物实验和附录三部分。概述主要讲述微生物实验课程开设的目的与意义、相关实验记录与报告的规范、实验室规则及安全注意事项、生物安全等内容。实验部分精选了微生物实验的无菌环境和操作,微生物实验的重要仪器,显微镜使用和形态学观察,微生物的培养、分离及生长,微生物遗传学技术,分子生物学技术,微生物检测和鉴定,微生物技术的应用等相关内容的实验。附录内容包括常用染色液的配制、常用培养基配方、常用缓冲液的配制。
本书以综合性大学、师范、医药和农林院校有关专业的大学本科生为对象,也可供其他微生物实验技术工作者参考。

编辑推荐
《普通高等教育"十三五"规划教材·生物工程生物技术系列:应用微生物学实验》以综合性大学、师范、医药和农林院校有关专业的大学本科生为对象,也可供其他微生物实验技术工作者参考。

作者简介
叶蕊芳,上海梅陇路130号华东理工大学259信箱,教授。
1.微生物学,1990年至今,本科生,48,华东理工大学
2.微生物学实验,1990年至今,本科生,32,华东理工大学
3.生命科学导论,2000年至2005年,32,华东理工大学

目录
概述1
第一章微生物实验的无菌环境和操作5
第一节微生物实验的无菌环境5
一、无菌室5
二、超净工作台6
三、环境无菌检测的方法8
第二节微生物实验的无菌操作14
一、无菌操作前的准备工作14
二、灭菌和消毒方法14
第二章微生物实验的重要仪器23
一、普通光学显微镜23
二、高压蒸汽灭菌锅24
三、移液器25
四、电子天平27
五、pH计28
六、分光光度计29
七、超净工作台30
八、恒温培养箱30
九、摇瓶培养设备30
十、冰箱及超低温冰箱31
十一、离心机32
十二、真空冷冻干燥机33
十三、PCR仪34
十四、厌氧培养箱35
十五、生物安全柜36
十六、电热恒温干燥箱37
第三章显微镜使用和形态学观察39
实验一普通光学显微镜的使用41
实验二暗视野显微镜的使用47
实验三相差显微镜的使用50
实验四微分干涉差显微镜的使用53
实验五荧光显微镜的使用56
实验六微生物大小测定59
实验七微生物的形态观察63
实验八微生物染色技术66
第四章微生物的培养、分离及生长72
实验九培养基的配制和高压蒸汽灭菌73
实验十微生物的接种分离和纯培养78
实验十一亨盖特法厌氧培养基的制备82
实验十二厌氧微生物的分离培养86
实验十三噬菌体的分离纯化和效价测定90
实验十四微生物的计数——血细胞计数法93
实验十五微生物的计数——平板活菌计数法96
实验十六比浊法测定细菌生长曲线99
实验十七干重和湿重法测定微生物的生长量102
第五章微生物遗传学技术104
实验十八微生物的诱变和突变株的筛选105
实验十九营养缺陷型突变株的选育108
实验二十菌种保藏技术112第六章分子生物学技术119
一、目的基因的获得119
二、载体系统的选择119
三、目的基因与载体的重组119
四、重组载体引入受体细胞120
五、重组受体细胞的筛选和鉴定120
六、目的基因在受体细胞内的表达120
实验二十一细菌总DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳121
实验二十二基本PCR技术扩增DNA片段124
实验二十三碱裂解法和试剂盒法提取质粒DNA126
实验二十四DNA分子的限制性内切酶消化、片段纯化、连接130
实验二十五感受态细胞的制备133
实验二十六重组DNA转化宿主细胞135
第七章微生物检测和鉴定137
实验二十七微生物的营养及生理生化反应138
实验二十八应用API—20E细菌鉴定系统鉴定肠杆菌科和部分其他革兰氏阴性杆菌142
实验二十九以细菌16SrRNA序列和真菌ITS序列为基础的菌种鉴定146
第八章微生物技术的应用150
实验三十土壤中纤维素分解菌的分离151
实验三十一食品样品中菌落总数的测定159
实验三十二食品样品中大肠菌群MPN值的测定161
实验三十三原生质体的制备167
实验三十四原生质体的融合169
附录Ⅰ常用染色液的配制171
附录Ⅱ常用培养基配方173
附录Ⅲ常用缓冲液的配制176
参考文献178

序言
全书分为概述、微生物实验和附录三部分。概述主要讲述微生物实验课程开设的目的与意义、相关实验记录与报告的规范、实验室规则及安全注意事项、生物安全等内容。实验部分精选了微生物实验的无菌环境和操作,微生物实验的重要仪器,显微镜使用和形态学观察,微生物的培养、分离及生长,微生物遗传学技术,分子生物学技术,微生物检测和鉴定,微生物技术的应用等相关内容的实验。既有涉及对加强学生微生物实验基本操作和技能的传统实验,也有一些设计型和综合型实验。这些实验既可以单独进行,也可以组合起来成为综合型实验,便于安排教学。附录内容包括常用染色液的配制、常用培养基配方、常用缓冲液的配制,可供读者参考。
本书以综合性大学、师范、医药和农林院校有关专业的大学本科生为对象,在编写的时候总结了编者三十多年的微生物实验教学经验及学生参加工作后的反馈建议,注重操作细节的描述,以实现操作的可重复性。本书也可供其他微生物实验技术工作者参考。同时本书在每个实验中都设计了预习思考题,以帮助学生对理论课上学到的知识进行总结归纳,将实验知识与理论教学更好地联系在一起。本书可作为微生物实验课程的教材,也可以作为微生物实验技术的工具书。
本书第一章、第四章(实验九、十、十三、十六、十七)、第五章、第八章(实验三十三、三十四)由叶蕊芳编写,概述、第二章由邱勇隽编写,第三章、第六章由郑一涛编写,第四章(实验十一、十二、十四、十五)、第七章、第八章(实验三十、三十一、三十二)由张晓彦编写。
本书内容不妥之处,敬请读者批评指正。

编者
于华东理工大学

文摘
版权页:



此外,无菌室内物品应力求简洁,凡与无菌室工作无直接关系的物品一律不能放人,以利保持无菌状态,避免因物品长期堆放形成死角。室内的空气与外界空气必须绝对隔绝,预留的通气孔道也应尽量密闭。通气孔道一般设有上下气窗,气窗面积宜稍大,并覆盖4层纱布以起到简单滤尘的作用。
由于有时实际情况往往不易全面做到理想的状态,因此只要严格无菌操作手续,在门窗敞开的室内,有一超净台的保护,接种的污染率是可以满足实验或生产的无菌要求的。
2.无菌室的空气系统
微生物是活的粒子,某些产孢子或芽孢的微生物在不利的状态下会变成孢子或芽孢,它们有很强的抵抗不良环境的能力和很长的潜伏期,是一种持续的潜在隐患。微生物会在空调系统中不断积存,一旦条件合适,就会大量繁殖。而不论普通空调系统还是工业净化空调系统都很容易在局部产生积尘和水分(或高湿度),形成一次污染。这一次污染(尘埃与水分的积累)恰恰为微生物的繁殖提供了必要条件,有可能导致细菌大量定殖、繁殖,产生大量有害的代谢物,形成了所谓的二次污染。尤其在空调箱整个系统停机期间(如下班或放假),会由于室外空气渗入、箱内温度回升以及冷凝水的积水不断蒸发,箱内的空间成为细菌繁殖的理想场所。因此一般的无菌室可不安装空调系统,一定要安装通风空调系统的无菌室,应按要求安装并定期清洁。

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